Ly tâm gradient mật độ (isodensity centrifugation method) còn được gọi là ly tâm vành đai.

của phương pháp này.ưu điểmCó thể tách một số hoặc tất cả các thành phần trong mẫu cùng một lúc, có độ phân giải tốt, hiệu quả tách tốt, có thể thu được các thành phần tinh khiết hơn cùng một lúc.

Nhược điểmLà thời gian ly tâm khá dài, cần chuẩn bị dịch độ dốc, yêu cầu thao tác cao.

Theo nguyên tắc tách ly tâm, độ dốc mật độ ly tâm có thể được chia thànhPhương pháp ly tâm vành đai tốc độ(Phương pháp ly tâm khu vực tốc độ, R-Z) 和Phương pháp ly tâm đẳng mật độ (Phương pháp ly tâm isopycnic)

Ly tâm vành đai tốc độ cũng có thể được gọi là ly tâm mật độ bằng nhau, là sự tinh khiết của mẫu hỗn hợp dựa trên kích thước thể tích khác nhau và hệ số lắng khác nhau của các hạt thành phần khác nhau trong mẫu.

Khi ly tâm, dung dịch mẫu cần tách được đặt trên cột chất lỏng gradient được hình thành bởi các vật liệu gradient mật độ như sucrose, cesium clorua (CsCI), * và mật độ của các hạt mẫu phải lớn hơn bất kỳ điểm nào trong cột chất lỏng gradient, nếu không sẽ không có hiệu ứng ly tâm vành đai lý tưởng. Khi ly tâm, các thành phần khác nhau trong mẫu hỗn hợp sẽ tạo thành các vành đai riêng biệt ở các vị trí khác nhau của cột chất lỏng gradient, chọn tốc độ quay và thời gian thích hợp để ly tâm, kết thúc ly tâm khi các nhóm vành đai phân vùng được kéo xa, sau đó vành đai khu vực được lấy ra.Như vậy chỉ cần thông qua một lần ly tâm là có thể tách các thành phần trong mẫu hỗn hợp ra tinh khiết, độ tinh khiết và tỷ lệ thu hồi đều có thể đáp ứng yêu cầu.

ưu điểmLà một sự tách biệt và tinh khiết, hệ số lắng của các thành phần chênh lệch hơn 20% có thể được lựa chọn phương pháp này, độ phân giải cao, hoạt động thành thạo có thể tách mẫu với hệ số lắng của các thành phần chênh lệch 5%~10%.

Nhược điểmLà giới hạn điều kiện của vật liệu, nồng độ chất lỏng mẫu không thể quá cao, nếu không điều kiện hoạt động rất khó kiểm soát, đồng thời phương pháp này so với phương pháp ly tâm khác biệt, lượng mẫu được xử lý nhỏ hơn nhiều.

Sơ đồ 1 Tốc độ vành đai ly tâm

Thời gian ly tâm của khu vực tốc độ phải được kiểm soát chặt chẽ, không thể quá ngắn, nếu không khu vực mẫu không mang rõ, thời gian cũng không thể quá dài, nếu không đợi phân tách thành phần có thể chìm xuống đáy. Tốc độ lắng của các hạt mẫu cần tách phụ thuộc vào các yếu tố như hình dạng, kích thước, mật độ và lực ly tâm của hạt. Tình trạng của mẫu trước và sau khi ly tâm được thể hiện trong Hình 1.

Ứng dụng cổ điển của ly tâm vành đai tốc độ là ly tâm thông qua gradient mật độ sucrose, thực hiện thanh lọc các bào quan dưới tế bào khác nhau (ribosome, ty thể, Exosome, v.v.) và các hạt virus (vectơ virus, vắc-xin, v.v.). Ví dụ, sự kết tủa ribosome 70S mà chúng ta thu được trong giai đoạn trước, sau khi thủy phân, có thể được ly tâm bằng cách sử dụng gradient mật độ sucrose, tiếp tục tách và tinh chế hai tiểu đơn vị 50S và 30S. Quy trình thí nghiệm cụ thể như sau:

Lớp học ly tâm đang đăng nhiều kỳ, liên tục chú ý tìm hiểu thêm phương pháp ly tâm!

Tập trung vào các lớp học ly tâm trước đây

□Các thuật ngữ phổ biến cho ly tâm - lực ly tâm và lực ly tâm tương đối

□Hệ số lắng đọng của thuật ngữ chung

□Phương pháp ly tâm nhanh để chuẩn bị huyết thanh exosome miễn phí

□Hiệu suất quay đầu Hệ số K và thời gian ly tâm

□Phương pháp ly tâm chênh lệch tốc độ, bạn đã chọn đúng phương pháp tách tinh khiết chưa?

□Phiền não diệt khuẩn trong phòng thí nghiệm, khu thương mại Tiểu Bối giảm 50% để giải quyết!

* Số phê duyệt: RA-051-cent-adv-ruo

* Sửa đổi: 16/10/2020

* Tuyên bố: Không có sửa đổi nào có thể được thực hiện mà không được phép và Beckmann Coulter có quyền cập nhật phiên bản bất cứ lúc nào mà không cần thông báo trước