tóm tắt

Quá trình chuẩn bị được sử dụng rộng rãi trong nhiều lĩnh vực, chẳng hạn như sàng lọc chọn lọc các hợp chất ứng cử viên hoặc các hợp chất thí điểm từ các hợp chất mới được tổng hợp hoặc để thực hiện phân tích cấu trúc các tạp chất trong thuốc, các thành phần của các chất tự nhiên có chức năng cụ thể. Chuẩn bị loại sắc ký chất lỏng siêu tới hạn (viết tắt là chuẩn bị)SFC) có ưu điểm là thời gian phân tích ngắn, xử lý sau đơn giản và được sử dụng rộng rãi trong ngành dược phẩm và nhiều lĩnh vực khác. Đối với các phân tích có số đỉnh sắc ký hạn chế, chẳng hạn như tách các đồng phân chiral, "mẫu lặp" có thể cải thiện hiệu quả chuẩn bị tinh chế. Báo cáo này mô tả một ví dụ về việc sử dụng chức năng "lấy mẫu lặp" của sắc ký chất lỏng siêu tới hạn loại chuẩn bị Nexera UC để cải thiện hiệu quả của các hoạt động chuẩn bị.

Từ khóa: Loại chuẩn bị SFC, mẫu lặp lại

1Sử dụngSFC để giảm thời gian phân tích

Do độ nhớt thấp và hệ số khuếch tán cao của carbon dioxide siêu tới hạn, ngay cả ở tốc độ dòng chảy cao,SFC cũng có áp suất cột sắc ký thấp. Điều này có nghĩa là tốc độ phân tích có thể được cải thiện mà không làm giảm hiệu ứng cột sắc ký. Do đó, thời gian phân tích của nó ngắn hơn nhiều so với HPLC.

Lấy ví dụ về chiral separation, sử dụng preparationSự tương phản giữa thời gian cần thiết để chuẩn bị LC và SFC Như thể hiện trong Hình 1, SFC loại chuẩn bị chỉ mất 1/4 thời gian tiêu thụ của LC loại chuẩn bị, nâng cao hiệu quả phân tích.

hìnhB5-05=giá trị thông số Kd, (cài 2)

Bảng1 Điều kiện phân tích

2Thêm mẫu lặp

"Iterative sample" là một tiêu chuẩnCông nghệ lấy mẫu liên tục của bộ lấy mẫu tự động SIL-40 và bộ thu phân đoạn FRS-40, sử dụng tiến trình lấy mẫu liên tục trong khoảng thời gian được giữ lại bởi đỉnh sắc ký, do đó tiết kiệm thời gian phân tích để cải thiện hiệu quả tách và nguyên lý hoạt động của nó được thể hiện trong Hình 2. Có một số điều bạn cần đặc biệt chú ý khi thực hiện thiết lập mẫu lặp:

• Chỉ áp dụng cho phân tích đẳng cấp

• Không có sự chồng chéo giữa các đỉnh sắc ký

hình2.2 Nguyên tắc làm việc của "mẫu lặp"

3Phương pháp thiết lập mẫu lần

Chức năng "lặp lại mẫu" có thể được thực hiện trongThiết lập dễ dàng trong phần mềm LabSolutions Workstation. Có thể dễ dàng xác nhận sự chồng chéo đỉnh sắc ký bằng cách đặt các tham số như "khoảng thời gian lấy mẫu", "số lần lấy mẫu" và "thời gian chờ xử lý trước tiếp theo" (Hình 3) và mô phỏng kết quả của một khoảng thời gian lấy mẫu nhất định (Hình 4) bằng cách sử dụng kết quả chạy đơn (biểu đồ sắc ký). Để lấy mẫu liên tục, bạn phải đặt thời gian chờ thích hợp để sau khi mẫu chảy ra khỏi vòng mẫu (Hình 5), vòng mẫu có thể được chuyển trở lại trạng thái LOAD (bên phải Hình 5).

hìnhB5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)

hìnhB5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)

hình.5 Hành động van mẫu (FRS-40)

Đối với thời gian thu thập dữ liệu, hãy nhập một sản phẩm lớn hơn thời gian phân tích đơn và cộng với khoảng thời gian lấy mẫu và số lần lấy mẫu. Ví dụ, vớiKhoảng thời gian lấy mẫu 0,8 phút 9 lần liên tiếp, thì giá trị đầu vào ít nhất là thời gian phân tích đơn cộng với 7,2 phút (Hình 6).

hìnhThời gian thu thập dữ liệu (SPD-M40)

Trả lại van phân đoạn về vị trí ban đầu sau mỗi chu kỳ lấy mẫu, sau đó cùng một đỉnh có thể được thu thập trong cùng một chai. Vì vậy,Phương pháp "lấy mẫu lặp" thu thập tất cả các đỉnh của cùng một hợp chất trong cùng một chai thu thập. Việc thu thập phần chưng cất sẽ được thực hiện theo quy trình thời gian, chỉ cần nhập vào quy trình thời gian cho một phân tích duy nhất, sau đó máy trạm có thể tự động tính toán thời gian thu thập phần chưng cất dựa trên khoảng thời gian lấy mẫu (sơ đồ)7 và 8)

hìnhB5-03=giá trị thông số Ki, (cài 3)

hình.8 Mối quan hệ giữa thời gian thiết lập lại và khoảng thời gian chuẩn bị

4"Lấy mẫu lặp" để tách mẫu chiral

Giới thiệu một cách sử dụng thực tếCác trường hợp cô lập chiral thuốc "mẫu lặp" với mẫu là10 mg/mL * dung dịch (methanol). Các điều kiện phân tích được thể hiện trong Bảng 2 và sắc ký kết quả được thể hiện trong Hình 9. Kết quả cho thấy, trong thời gian phân tích 10,5 phút, số lần lấy mẫu có thể tăng từ 3 lần lấy mẫu thông thường lên 9 lần "lấy mẫu lặp", cải thiện hiệu quả của các thao tác chuẩn bị.

Bảng2 Điều kiện phân tích

hình.9 * Các trường hợp riêng biệt